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高效液相色譜儀化學鍵合固定相的使用

  高效液相色譜儀硅膠鍵合相的穩(wěn)定性:

  1、鍵合相的使用壽命取決于鍵合的有機官能團在硅膠表面的覆蓋程度。當覆蓋量大或呈多分子覆蓋層時,會增加穩(wěn)定性。

  2、通常正相鍵合相的穩(wěn)定性低于反相鍵合相。

  3、反相烷基鍵合相的穩(wěn)定性與使用的流動相的PH值有關,通常水溶液的PH= 2~8。

  4、硅膠中的殘留硅醇基會對色譜分離產生不良影響。

  鍵合相色譜分離的重現性:由于鍵合相制備時選用基體硅膠特性的差別和鍵合反應時官能團覆蓋量的不同,會產生載體誘導選擇性的變化。

  鍵合相色譜分離的選擇性:在反相色譜中,高效液相色譜儀使用同一種ODS固定相,并用兩種極性相近但由不同溶劑組成的流動相時,會由于溶劑誘導選擇性的變化,而獲得不同的分析結果。

  疏水塌陷:鍵合相色譜柱在有機溶劑含量低甚至100%水流動相條件下,一旦流速停止,推動水溶液流動相進入硅膠孔隙的壓力減小,高效液相色譜儀疏水的微孔表面排斥極性流動相,會發(fā)生鍵合相孔隙脫水,從而導致所謂的疏水塌陷,對化合物的保留能力大大減弱。


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